селективный — Викисловарь

Морфологические и синтаксические свойства[править]

падеж		ед. ч.			мн. ч.
		муж. р.	ср. р.	жен. р.
Им.		селекти́вный	селекти́вное	селекти́вная	селекти́вные
Рд.		селекти́вного	селекти́вного	селекти́вной	селекти́вных
Дт.		селекти́вному	селекти́вному	селекти́вной	селекти́вным
Вн.	одуш.	селекти́вного	селекти́вное	селекти́вную	селекти́вных
	неод.	селекти́вный			селекти́вные
Тв.		селекти́вным	селекти́вным	селекти́вной селекти́вною	селекти́вными
Пр.		селекти́вном	селекти́вном	селекти́вной	селекти́вных
Кратк. форма		селекти́вен	селекти́вно	селекти́вна	селекти́вны

се-лек-ти́в-ный

Прилагательное, тип склонения по классификации А. Зализняка — 1*a.

Корень: -селективн-; окончание: -ый ^{[Тихонов, 1996]}.

Произношение[править]

• МФА: [sʲɪlʲɪˈktʲivnɨɪ̯] 

Семантические свойства[править]

Значение[править]

1. книжн. относящийся не ко всем, применяемый выборочно, избирательный ◆ Этот подход успешно применяется в микроэкономическом анализе селективного влияния монетарной политики на отдельно взятые финансовые учреждения. В. П. Бауэр, «Золото как фактор экономического роста», 2004 г. // «Финансы и кредит» (цитата из Национального корпуса русского языка, см. Список литературы)

Синонимы[править]

1. частичн.: выборочный, избирательный

Антонимы[править]

1. всеобщий, неселективный

Гиперонимы[править]

Гипонимы[править]

1. иммуноселективный

Родственные слова[править]

Этимология[править]

Происходит от франц. sélectif «отбирающий, выбирающий; выборочный», далее из selectus «выбранный», прич. прош. от sēligere «выбирать, избирать», далее из se- (выражает отделение, устранение) + legere «собирать, читать» (восходит к праиндоевр. *leg- «собирать, подбирать») + франц. -if (-ive) из лат. -ivus «способный к чему-нибудь, способный произвести, вызвать, обнаружить что-нибудь» .

Фразеологизмы и устойчивые сочетания[править]

Перевод[править]

Список переводов

Библиография[править]

Что такое селективность автоматических выключателей?

Установка и выбор автоматического выключателя должны учитывать требование селективности.
Селективностью автоматических выключателей является подбор устройств в одной системе таким образом, чтобы при повреждениях или возникновении аварийной ситуации на любом участке электросистемы, отключение производилось одним автоматом, который расположен ближе всего к месту повреждения на линии и другие автоматы не срабатывали. То есть, если неисправность или авария произошли в районе розетки, то отключается только автомат розеточной группы этого помещения, а автоматы, стоящие между счетчиком и этим автоматом, не отключаются.
Различают несколько вариантов селиктивности. Полной селективностью называют вариант выбора и установки автоматических выключателей, который при любом повреждении отключается дальний от вводного автомат, а остальные остаются включенными.
Частичной селективностью называют вариант выбора и установки автоматических выключателей с условием, чтобы при неисправности отключение дальнего автомата происходило при меньших величинах тока короткого замыкания, а при полной величине тока короткого замыкания условие может не соблюдаться.
Отсутствие селективности – это вариант установки автоматов таким образом, что выключение происходит сразу нескольких автоматов одновременно.

Для чего нужны двухполюсные автоматические выключатели?

Многие считают, что автоматические выключатели с двумя полюсами совершенно не нужны, так как однополюсный автомат, установленный на фазном проводе отключается и обесточивает всю систему. Но такая установка не гарантирует полную безопасность системы после отключения, так как токи в нейтрали могут присутствовать после отключения одного из фазных проводов.
Чтобы избежать подобных ситуаций, нужно в двухпроводной сели устанавливать автоматические двухполюсные автоматические выключатели, которые отключают сразу оба провода.
Модульные двухполюсные автоматические выключатели устанавливаются на стандартную DIN-рейку и занимают место двух однополюсных устройств (36 мм).
Характеристики двухполюсных автоматических выключателей могут иметь все варианты: В, С, D.
Применяемость двухполюсных автоматических выключателей не настолько широка как однополюсных или трехполюсных, но их все же применяют в строительстве и производственных нуждах.
В квартирах и домах двухполюсный автоматический выключатель не заменим в качестве вводного автомата, особенно в старом жилищном фонде, где вся проводка имеет всего два провода. При отключении такого автомата, можно с полной уверенностью говорить о безопасности проведения любых ремонтных работ и работ по обслуживанию электросистем квартиры. Но, несмотря, ни на что, количество установленных двухполюсных автоматов всегда меньше чем однополюсных автоматов. Обычно количество однополюсных в три раза превышает количество двухполюсных.
Кроме описанного использования двухполюсного автомата в качестве вводного для двупроводной сети, его можно использовать в качестве управляющего и защитного элемента для систем с технологической (механической, кинематической и другой) связью. То есть при отключении одного устройства из-за неисправности должно произойти отключение другого устройства, которое не может работать при остановке первого. Причем питание этих устройств может происходить по двум независимым линиям, но отключаться они одновременно. Это свойство двухполюсного автомата используют крайне редко.
Примером использования двухполюсного автоматического выключателя для автоматизации системы можно считать подключение электрического отопительного котла и циркуляционного насоса. В этом случае мощный нагревательный элемент котла запитан через один полюс автомата, а насос со значительно меньшей мощностью через другой. При неисправности нагревательного элемента котла произойдет отключение сразу двух устройств. Но особенно важным случаем будет неисправность насоса, которая отключит нагревательный элемент и не допустит перегрева котла при отсутствии циркуляции воды в системе.

Что такое селективность? Расчет селективности автоматических выключателей

Под селективностью понимается отлаженный механизм работы приборов защиты электрических цепей. В результате действия предохранителей или автоматических выключателей предотвращается сгорание электропроводки и выход из строя подключенных к ней нагрузок при коротких замыканиях и превышениях номиналов на отдельных участках, когда остальная часть схемы продолжает работать.

Схема работы автоматов

Представление о том, что такое селективность, можно получить, если рассмотреть схему работы домашнего электрического щита.

При коротком замыкании на кухне или в другом помещении должен сработать только тот защитный аппарат, который относится к данной цепи. Автомат на вводе при этом не отключится и будет проводить электричество к остальным участкам. Если по каким-либо причинам выключатель для кухни не сработал, тогда неисправность проконтролирует автомат ввода, отключив питание во всех электрических цепях.

Классификация

Что такое селективность автоматов, можно представить в виде их подборок и схем подключения.

1. Полная. При последовательном подключении нескольких аппаратов на сверхтоки реагирует тот, который расположен ближе к аварийной зоне.
2. Частичная. Защита аналогична полной, но действует только до определенной величины сверхтока.
3. Временная. Когда у последовательно подключенных аппаратов с одинаковыми токовыми характеристиками устанавливается разная временная выдержка на срабатывание с ее последовательным увеличением от участка с неисправностью до источника питания. Временная селективность автоматов используется с целью подстраховки друг друга по скорости отключения. Например: первый срабатывает через 0,1 сек, второй — через 0,5 сек, третий — через 1 сек.
4. Токовая. Селективность аналогична временной, только параметром является максимально-токовая отсечка. Аппараты выбирают в сторону уменьшения уставки от источника питания до объектов загрузки (например, 25 А на вводе и далее, 16 А к розеткам и 10 А — к освещению).
5. Времятоковая. В автоматах предусмотрена реакция на ток, а также — время. Автоматы делятся на группы A, B, C, D. На них организовать временную селективность при КЗ (коротком замыкании) сложно, поскольку характеристики аппаратов налагаются друг на друга. Максимальный защитный эффект достигается в группе A, которая применяется преимущественно для электронных цепей. Наиболее распространены устройства типа С, но бездумно и где попало устанавливать их не рекомендуется. Группа D применяется для систем электропривода с большими пусковыми токами.
6. Зонная. За работой электросети следят измерительные устройства. При достижении порога уставки (заданного предельного значения) данные передаются в центр контроля, где выбирается автомат для отключения. Способ используется в промышленности, поскольку является сложным, дорогостоящим и требующим отдельных источников питания. Здесь применяются электронные расцепители: при обнаружении неисправности нижерасположенный автомат подает сигнал вышерасположенному и тот начинает отсчитывать интервал времени, составляющий около 50 мсек. Если расположенный ниже выключатель за это время не сработает, включается тот, который расположен выше по цепи.
7. Энергетическая. Автоматы имеют высокое быстродействие, за счет чего ток КЗ не успевает достичь максимума.

Виды селективности

Селективность защиты подразделяется на абсолютную или относительную, в зависимости от того, какие участки отключаются. Для первого случая надежней всего срабатывают предохранители на поврежденном участке цепи. Во втором отключаются выше расположенные автоматы, если защита ниже не отработала по разным причинам.

Таблицы селективности

Селективная защита работает в основном при превышении номинала I_n автоматического выключателя, т. е. при небольших перегрузках. При коротких замыканиях добиться ее значительно сложней. Для этого производители продают изделия с таблицами селективности, с помощью которых можно создавать связки с избирательностью срабатывания. Здесь можно выбирать группы аппаратов только одного изготовителя. Таблицы селективности представлены ниже, их можно найти также на сайтах предприятий.

Для проверки избирательности между вышестоящим и нижестоящим аппаратами находится пересечение строки и столбца, где «Т» — это полная селективность, а число — частичная (если ток КЗ меньше указанного в таблице значения).

Расчет селективности автоматов

Защитными устройствами в основном служат обычные выключатели, селективность которых необходимо обеспечивать путем правильного выбора и настроек. Их избирательное действие для защиты, установленной ближе к источнику питания, обеспечивается путем выполнения следующего условия.

• I_{с.о.послед} ≥ K_н.о.∙ I_{к.пред., где:
  — Iс.о.послед— ток, при котором срабатывает защита;
  — Iк.пред. — ток короткого замыкания в конце зоны действия защиты, расположенной на большем удалении от источника питания;
  — Kн.о. — коэффициент надежности, зависящий от разброса параметров.}

Что такое селективность при регулировании автоматов по времени, видно из соотношения ниже.

• t_{с.о.послед} ≥ t_к.пред.+ ∆t, где:
  — t_{с.о.послед} и t_{к.пред.— временные интервалы, через которые срабатывают отсечки автоматов, соответственно расположенных рядом и на удалении от источника питания;
  — ∆t — временная ступень селективности, выбираемая по каталогу.}

Графическое изображение селективности

Для надежной токовой защиты электропроводки необходима карта селективности. Она представляет собой схему времятоковых характеристик аппаратов, установленных поочередно в цепи. Масштаб выбирается так, чтобы по граничным точкам было видно защитные свойства аппаратов. На практике карты селективности в проектах преимущественно не используются, что является большим недостатком и приводит к отключениям электричества у пользователей.

Соотношение номиналов должно быть как минимум 2,5 для обеспечения селективности. Но даже у них есть общие зоны срабатывания, хотя и небольшие. Только при соотношении 3,2 не наблюдается их пересечение. Но в этом случае один из номиналов может получиться завышенным и придется установить после автомата проводку большего сечения.

В большинстве случаев селективность защиты не требуется. Она нужна только там, где могут возникнуть серьезные последствия.

Если в расчете получаются завышенные значения номиналов автоматов, на вводе устанавливают рубильники или выключатели нагрузки.

Можно также применять специальные селективные автоматы.

Селективные автоматы S750DR

Компания АВВ выпускает изделия марки S750DR, где селективность выключателей обеспечивается дополнительным токовым путем, который не разъединяется после срабатывания основного контакта при коротком замыкании.

При отключении нижерасположенного аварийного участка селективным биметаллическим контактом создается задержка по времени срабатывания. При этом основной контакт селективного выключателя возвращается на место под действием пружины. Если сверхток продолжает поступать, через 20-200 мсек отключается тепловая защита в основной и дополнительной цепях. При этом селективная биметаллическая пластина блокирует механизм расцепления, и пружина уже не сможет обратно замкнуть основной контакт.

Ограничение по току автомата обеспечивается за счет селективного резистора на 0,5 Ом и большого сопротивления электрической дуги внутри аппарата.

Заключение

Что такое селективность, легко понять при рассмотрении электрических цепей с последовательным подключением автоматов. Их нетрудно подобрать, чтобы обеспечить избирательность срабатывания по перегрузкам. Сложности появляются при больших токах короткого замыкания. Для этого применяется несколько методов, а также специальные автоматы компании АВВ, создающие задержку на срабатывание во времени.

Селективные по ЦОГ-2 (включая Bextra, Celebrex и Vioxx) и неселективные нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП)

Для получения прошлой информации о нестероидных противовоспалительных препаратах (НПВП), пожалуйста, см. Архив FDA

[4/7/2005] Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) выпустило дополнительные письма-запросы спонсорам всех нестероидных противовоспалительных средств. воспалительные препараты (НПВП), требующие внесения изменений в маркировку их продуктов.Эти письма включают рекомендуемую предлагаемую маркировку как рецептурных, так и внебиржевых (OTC) НПВП, а также руководство по лекарствам для всего класса рецептурных продуктов. Всех спонсоров продаваемых по рецепту нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП), включая целебрекс (целекоксиб), НПВП, селективный по ЦОГ-2, попросили пересмотреть маркировку (вкладыш в упаковке) для своих продуктов, чтобы включить предупреждение в рамке с выделением возможность повышенного риска сердечно-сосудистых (СС) событий и хорошо описанные, серьезные, потенциально опасные для жизни желудочно-кишечные (ЖКТ) кровотечения, связанные с их использованием.Маркировка Celebrex будет, помимо общей маркировки, которая будет применяться ко всем НПВП, также будет содержать данные о безопасности, полученные в результате длительных испытаний лечения целекоксибом.

Производителей

безрецептурных (безрецептурных) НПВП просят пересмотреть их маркировку, чтобы предоставить более конкретную информацию о потенциальных рисках сердечно-сосудистых заболеваний и желудочно-кишечного тракта их отдельных продуктов и напомнить пациентам об ограниченной дозе и продолжительности приема. лечение этих продуктов в соответствии с инструкциями на упаковке

При принятии этих решений Центр оценки и исследований лекарственных средств (CDER) рассмотрел профиль риска / пользы для каждого из препаратов.Также рассмотрено было;

Дополнительную информацию об объявляемых решениях и конкретные детали относительно отдельных продуктов можно найти в документах, размещенных на этой веб-странице.

• Меморандум о решении — Анализ и рекомендации для действий агентства — Избирательные и неселективные НПВП по ЦОГ-2 (PDF — 143 КБ) (опубликовано 6 апреля 2005 г., опубликовано 15 апреля 2005 г.)
• Селективные препараты по ЦОГ-2 ( включая Bextra, Celebrex и Vioxx)
• НПВП, отпускаемые по рецепту (15.06.2005)
• НПВП, отпускаемые без рецепта
  • Новый 15 июля 2005 г.Агентство выпустило новые письма с запросами на дополнительную маркировку безрецептурных НПВП. Агентство получило комментарии от промышленности относительно письма-запроса на дополнительную маркировку и шаблона маркировки от 14 июня. По завершении нашего обзора комментариев Агентство решило внести изменения в шаблон маркировки OTC и выпустить новое письмо с запросом на дополнительную маркировку.
• Таблица лекарственных препаратов — Селективные нестероидные противовоспалительные препараты ЦОГ-2 (НПВП) и неселективные НПВП, отпускаемые по рецепту и без рецепта (ОТС), одобренные в соответствии с заявкой на новое лекарство (NDA) Сокращенная заявка на новое лекарство (ANDA)

Селективные препараты по ЦОГ-2

Bextra (вальдекоксиб) 7 апреля 2005 г. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) попросило Pfizer добровольно удалить Bextra ( валдекоксиб) с рынка.

Вернуться к началу

Celebrex (целекоксиб) Общая информация Предупреждение FDA: 3/2005. На основании новой информации, в том числе предварительных отчетов одного из нескольких долгосрочных исследований по профилактике, проведенных Национальным институтом здравоохранения (NIH), риск сердечно-сосудистых событий (комбинированная конечная точка, включая ИМ, сердечно-сосудистые заболевания и смерть) может увеличиваться у пациентов, получающих Целебрекс.FDA проанализирует всю доступную информацию из этих исследований, чтобы определить, необходимы ли дополнительные регулирующие меры.

Вернуться к началу

Vioxx (рофекоксиб) [30.09.2004] Merck & Co., Inc. объявила о добровольном выходе компании Vioxx (рофекоксиб) из на рынке США и всего мира из-за опасений по поводу безопасности повышенного риска сердечно-сосудистых событий (включая сердечный приступ и инсульт) у пациентов, принимающих Vioxx.Vioxx — это рецептурный селективный нестероидный противовоспалительный препарат ЦОГ-2 (НПВП), который был одобрен FDA в мае 1999 года для облегчения признаков и симптомов остеоартрита, для лечения острой боли у взрослых и для лечения лечение менструальных симптомов. Позже Vioxx был одобрен для облегчения признаков и симптомов ревматоидного артрита у взрослых и детей. Общая информация

Другие рецептурные неселективные НПВП

Селективные нестероидные противовоспалительные препараты по ЦОГ-2 (НПВП) и рецептурные и безрецептурные (OTC) Неселективные НПВП, одобренные в соответствии с заявкой на новые лекарства (NDA) Сокращенная заявка на новые лекарства (ANDA)

Селективные НПВП по ЦОГ-2

Фирменное наименование Celecoxib

Химическое название		Celebrex
Valdecoxib	Bextra
Rofecoxib	Vioxx

Неселективные NSAID

Ансрофиден 46 Илрбипрофен33 Мерадолак

Диклофенак	Cataflam, Voltaren, Arthrotec (комбинация с h мизопростол)
Дифлунисал	Долобид
Этодолак	Лодин, Лодин XL
Фенопрофен	Налфон, Налфон 200
Флурбипрофен Motrin, Motrin IB, Motrin Migraine Pain, Advil, Advil Migraine Liqui-gels, Ibu-Tab 200, Medipren, Cap-Profen, Tab-Profen, Profen, Ibuprohm, Children’s Elixsure * , Vicoprofen (в комбинации с гидрокодоном), Combunox (комбинация с оксикодоном)
Индометацин	Индоцин, Индоцин SR, Индо-Леммон, Индометеган
Кетопрофен **	Орувайл, Орудис, Актрон
Кеторолак	Мерадолак	Ponstel
Meloxicam	Mobic
Nabumetone	Relafen
Напроксен **	Aleve, Naprosyn, Anaprox, Anaprox DS, EC-Naproxyn, Naprelan, Naprapac (вместе с лансопразолом)
Оксапрозин	Daypro
Пироксикам	Clinoril
Толметин	Tolectin, Tolectin DS, Tolectin 600

* Существует много безрецептурных комбинаций с ибупрофеном: Advil Cold And Sinus, Advil Sinus, Advil Allergy Детская Advil Allergy Sinus, Ibuprohm Cold and Sinus, Sine-Aid IB, Children’s Motrin Cold. ** Существуют безрецептурные версии этих рецептурных препаратов.

• Текущее содержание с:

  06.02.2018

Frontiers | Раннее извлечение сальмонеллы из пищевых продуктов с использованием 6-часового неселективного предварительного обогащения и переработки тетратионатного бульона

Введение

Воздействие заражения пищевых продуктов Salmonella на здоровье населения привело к разработке нескольких комплексных методов на основе культивирования для обнаружения Salmonella в пищевых продуктах.Они содержатся, в частности, в Бактериологическом аналитическом руководстве (BAM) Управления по контролю за продуктами и лекарствами (FDA), Руководстве по микробиологической лаборатории (MLG) Министерства сельского хозяйства США (USDA) и ISO 6579: 2002 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения видов Salmonella (ISO) (ISO, 2002; USDA, 2014; FDA, 2015). Текущий метод, используемый FDA, описанный в BAM, требует 24-часовой реанимации в неселективном бульоне предварительного обогащения с последующим параллельным 24-часовым селективным обогащением в бульонах Тетратионата (TT) и Раппапорта-Вассилиадиса (RV) для уменьшить рост конкурирующих бактерий (FDA, 2015).Затем аликвоты обогащений TT и RV высевают на селективные агары, которые инкубируют от 24 до 48 часов. Предполагаемые колонии Salmonella выделяют для подтверждающего тестирования, которое может занять еще 2–3 дня.

Важные соображения для успешного извлечения Salmonella из пищевых продуктов включают тип пищи, уровень стресса или травмы, которым подвергается Salmonella матрицей пищи или производственной средой, наличие конкурирующих бактерий и уровень Salmonella (D’Aoust, 1981; Busse, 1995).Предыдущие исследования отметили важность реанимации подвергшихся стрессу и травм Salmonella , поэтому современные методы используют специальные неселективные бульоны предварительного обогащения для извлечения Salmonella из пищи (Rappaport et al., 1956; D’Aoust and Maishment, 1979; D ‘Aoust, 1981; Ray, 1989; Chen et al., 2013). Добавки, такие как соли желчных кислот, краситель бриллиантовый зеленый, MgCl ₂ и краситель малахитовый зеленый, добавляют в бульоны, используемые для селективного обогащения, чтобы уменьшить количество конкурирующих бактерий в пищевых продуктах, испытанных на загрязнение Salmonella (Teague and Clurman, 1916; Rappaport et al., 1956; Вассилиадис и др., 1978; Peterz et al., 1989). Например, низкие уровни Salmonella , измеренные в кедровых орехах (0,028–0,093 МПН / г) и перца (0,04–0,05 КОЕ / г), причастные к недавним вспышкам, подчеркивают необходимость неселективного предварительного обогащения перед заражением. селективное обогащение для повышения вероятности обнаружения, особенно для травмированных или подвергшихся стрессу организмов, которые не выжили бы в бульонах селективного обогащения (Lehmacher et al., 1995; Wang et al., 2015).

Общим для всех методов обнаружения, используемых для выделения Salmonella из пищевых продуктов, независимо от типа пищи или неселективного бульона предварительного обогащения, является использование селективных бульонов TT и RV.Селективное действие TT включает: соли желчных кислот и краситель бриллиантовый зеленый для подавления грамположительных бактерий; раствор йода-йодида (I ₂ –KI), добавляемый к основному бульону для индукции продукции TT, обеспечивая метаболическое преимущество организмам, имеющим TT-редуктазу, таким как Salmonella ; и карбонат кальция для нейтрализации серной кислоты, образующейся при восстановлении TT, таким образом поддерживая pH (Teague and Clurman, 1916; Knox, 1945; Palumbo and Alford, 1970; Moats et al., 1974; D’Aoust, 1981; Moats, 1981).Рост Salmonella в бульоне TT зависит от способности Salmonella снижать TT и противостоять бактерицидной активности красителя бриллиантового зеленого. Примечательно, что во время инфекции в кишечнике человека Salmonella вызывает воспаление тканей кишечника, вызывая выработку ТТ, который он может использовать в качестве источника энергии посредством анаэробного дыхания, что дает этому организму конкурентное преимущество перед конкурирующими бактериями, которые используют ферментацию в этой анаэробной среде. (Винтер и др., 2010).

Бульон

Rappaport – Vassiliadis обладает различными селективными свойствами для улучшения восстановления Salmonella , а именно MgCl ₂ в концентрации, которая создает гипертонические условия, которые подавляют Proteus и Escherichia coli , и малахитовый зеленый для подавления других конкурирующих бактерий (Rappaport et al. al., 1956; Vassiliadis et al., 1978; Peterz et al., 1989). Важно использовать MgCl ₂ вместо других солей Mg, таких как MgS ₂ 0 ₃ , MgBr ₂ , Mg (N0 ₃ ) ₂ , BaCl ₂ , CaS ₂ 0 ₃ .Ca (N0 ₃ ) ₂ , CaBr ₂ , Cal ₂ , KNO ₃ или BeCI ₂ в RV, поскольку эти другие соли не столь селективны (Rappaport et al., 1956) . Низкий pH RV, хорошо переносимый Salmonella , обеспечивает дополнительную селекцию против колиформ (Rappaport et al., 1956; Vassiliadis et al., 1981; Vassiliadis, 1983). Вместе свойства бульона RV, MgCl ₂ , низкий pH и малахитовый зеленый, обеспечивают высокое осмотическое давление, низкий pH, который со временем снижается с метаболизмом бактерий, и ингибирование грамположительных организмов, соответственно, что обеспечивает благоприятные условия для роста Salmonella (van Schothorst and Renaud, 1985; Peterz et al., 1989). Дополнительной селективной особенностью бульонов RV и TT является температура инкубации выше 37 ° C для снижения конкурентоспособности бактерий (D’Aoust, 1981; Peterz et al., 1989). FDA BAM рекомендует инкубировать среду RV в течение 24 ± 2 часов при 42 ± 0,2 ° C и инкубировать бульон TT в течение 24 ± 2 часов при 43 ± 0,2 ° C (FDA, 2015).

Несмотря на эффективность и доказанный успех современных методов на основе культивирования для обнаружения Salmonella , сокращение времени обнаружения является приоритетом для безопасности пищевых продуктов. Подходы к сокращению времени обнаружения включают сокращение продолжительности неселективного и селективного обогащения, изменение рецептуры бульона и изменение температуры инкубации.Попытки изменить время и температуру обогащения дали неоднозначные результаты (Mohr et al., 1974; van Schothorst и van Leusden, 1975; D’Aoust and Maishment, 1979). Одно исследование показало, что Salmonella способна реанимировать в достаточной степени через 5-6 часов в неселективном бульоне предварительного обогащения и может преодолевать токсические эффекты избирательного обогащения (Chen et al., 1993). Однако самые ранние исследования с укороченным неселективным предварительным обогащением были безуспешными (Mohr et al., 1974; van Schothorst and van Leusden, 1975; D’Aoust and Maishment, 1979).Дополнительные исследования по сокращению времени выборочного обогащения также не увенчались успехом из-за ложноотрицательных результатов, особенно в отношении пищевых продуктов с низким содержанием влаги (D’Aoust et al., 1990).

Выбор неселективных и селективных бульонов для предварительного обогащения зависит от исследуемых пищевых продуктов или образцов окружающей среды. Руководства FDA BAM, USDA MLG и ISO определяют составы обогащающих сред, которые подходят для обнаружения Salmonella в пищевых продуктах, на основе таких характеристик, как pH, высокая или низкая микробная нагрузка в пищевых продуктах и ​​влажность пищевых продуктов (ISO, 2002; USDA, 2014; FDA, 2015).Продукты, которые регулируются FDA, делятся на 35 категорий, для которых требуется 15 различных бульонов с предварительным обогащением (FDA, 2015).

Молекулярные методы, такие как количественная ПЦР, и автоматизированные платформы, такие как VIDAS Easy, успешно обнаружили Salmonella в 24-часовом неселективном предварительном обогащении кедровых орехов, порошка чили, мягкого сыра, сырой рыбы и помидоров тем самым сокращая время обнаружения (Cheng et al., 2009; Wang et al., 2015). Однако методы, основанные на культуре, считаются золотым стандартом для регулирующих органов, подчеркивая важность сокращения времени обнаружения в зависимости от культуры.Такие методы, как гель-электрофорез в импульсном поле и полногеномное секвенирование, используемые в настоящее время для обратного анализа во время расследований вспышек болезней пищевого происхождения, требуют чистых культур бактерий (Swaminathan et al., 2001; Allard et al., 2016).

Последние достижения в области высокопроизводительного секвенирования ДНК открывают возможности для профилирования микробиомов, связанных с товарами, либо посредством секвенирования ампликона гена 16S рРНК, либо путем метагеномного секвенирования полногенома. Метагеномное секвенирование обеспечивает точные данные обо всем микробном сообществе, включая организмы, которые нельзя культивировать традиционными методами (Caporaso et al., 2012). В исследованиях, направленных на улучшение обнаружения патогенов пищевого происхождения, использовалось профилирование микробиома для характеристики пищевых микробиомов и отслеживания изменений микробного сообщества в процессе культивирования БАМ (Pettengill et al., 2012; Ottesen et al., 2013; Jarvis et al., 2015; Leonard et al. ., 2015). Эти исследования также демонстрируют ценность профилирования микробиома для характеристики роста патогенов Salmonella и Escherichia coli среди сложных бактериальных сообществ, которые естественным образом населяют листовые зеленые продукты и томаты (Pettengill et al., 2012; Оттесен и др., 2013; Джарвис и др., 2015; Леонард и др., 2015). Этот подход особенно подходит для характеристики конкурирующих членов микробного сообщества, которые будут препятствовать обнаружению патогенов в зараженных пищевых продуктах.

В этом исследовании мы использовали комбинацию микробиологических и метагеномных методов, чтобы охарактеризовать и протестировать потенциальные изменения метода FDA BAM для обнаружения Salmonella в листовой зелени. Во-первых, четыре неселективных бульона предварительного обогащения, включая бульон лактозы, модифицированную забуференную пептонную воду (mBPW), триптиказо-соевый бульон (TSB) и универсальный бульон предварительного обогащения (UP), сравнивали в методе культивирования BAM FDA с использованием кинзы в качестве модель для листовых зеленых продуктов.Во-вторых, мы протестировали изменения в рецептуре бульона FDA BAM TT, которые снижали селективное давление за счет устранения бриллиантового зеленого и снижения концентрации йода следующим образом: (1) TT, составленный в соответствии с FDA BAM с бриллиантовым зеленым и 2% I ₂ -КИ раствор; (2) TT _A , без бриллиантового зеленого, 2% раствор I ₂ -KI; и (3) TT _B , без бриллиантового зеленого, 1% раствор I ₂ –KI. В-третьих, мы проверили эффективность 5- и 6-часового времени неселективного предварительного обогащения в сочетании с различными составами бульона TT для выделения Salmonella из пищи.

Мы оценили эффективность этих изменений в методе BAM путем подсчета уровней заражения Salmonella в неселективных предварительных обогащениях и использовали секвенирование ампликона гена 16S рРНК для определения микробных сообществ при селективном обогащении бульонов TT и RV. Наконец, мы протестировали комбинацию сокращенного времени неселективного предварительного обогащения и сниженной селективности TT для выделения Salmonella из сырых куриных бедер, жидких цельных яиц и арахисового масла.

Это исследование демонстрирует, что менее селективный состав бульона BAM TT, инокулированный 6-часовым неселективным предварительным обогащением, последовательно выявлял Salmonella на день раньше, чем текущий метод культивирования BAM FDA. Кроме того, мы показываем, что этот метод может быть адаптирован для использования с другими продуктами питания, что является преимуществом для лабораторий общественного здравоохранения, которые тестируют различные продукты.

Материалы и методы

Матрицы пищевых продуктов, протестированные в этом исследовании

В этом исследовании были протестированы четыре продукта питания, включая кинзу, сырые куриные бедра, жидкие цельные яйца и арахисовое масло.Образцы кинзы, предоставленные Министерством сельского хозяйства и развития сельских районов в Лансинге, штат Мичиган или купленные в местном продуктовом магазине, перед тестированием хранили при 4 ° C. Сырые куриные бедра и жидкие цельные яйца, купленные в местном супермаркете, перед тестированием хранили при 4 ° C. Образцы арахисового масла, приобретенные в местном продуктовом магазине, хранили при комнатной температуре.

Бактериальные штаммы для пищевых инокуляций

Девять штаммов Salmonella enterica , представляющих четыре серовара, Newport, Tennessee, Thompson и Enteritidis, использовали для инокуляции пищевых продуктов (Таблица 1).Два штамма, использованные для инокуляции кинзы, S . Ньюпорт SALC14 и S . Tennessee SALC 76 были выращены из кинзы в нашей лаборатории, а третий штамм, S . Thompson SALC 818 был выбран потому, что S . Томпсон был замешан в вспышке кориандра в 1999 г. (Campbell et al., 2001). Три S . Штаммы Теннесси, используемые для инокулирования арахисового масла, были выделены из арахисового масла во время вспышки арахисового масла в 2007 году (Wilson et al., 2016) и S . Штаммы Enteritidis, использованные для прививки цыплят и яиц, были выделены из соответствующих пищевых продуктов (таблица 1). Культурные фонды, хранящиеся при –80 ° C, наносили штрихами на чашки с триптиказо-соевым агаром (Difco, Sparks, MD, USA) и инкубировали в течение ночи при 35 ± 2 ° C. Суспензии бактериальных клеток, равные 0,48–0,52 единиц мутности МакФарланда (что соответствует приблизительно 1 × 10 ⁸ КОЕ / мл), готовили в 0,85% стерильном физиологическом растворе и серийно разбавляли приблизительно до 28 КОЕ / мл для пищевых инокуляций.

ТАБЛИЦА 1. штаммов Salmonella , используемых для инокуляции пищевых продуктов.

Перед инокуляцией жидкие цельные яйца гомогенизировали в стерильных стаканах, а сырые куриные бедра нарезали кубиками на квадраты размером приблизительно 1 дюйм с помощью стерильных ножей. Все продукты асептически разливали (25 г) в стерильные пакеты Whirlpak (Nasco; Форт Аткинсон, Висконсин, США), инокулировали примерно 28 КОЕ Salmonella на 25 г пищи и выдерживали для имитации естественного заражения при 4 ° C в течение 48 дней. –72 часа (кинза, жидкие цельные яйца и куриные бедра) или при комнатной температуре в течение 14 дней (арахисовое масло).Также готовили и выдерживали неинокулированные контрольные образцы для каждого корма.

Неселективное предварительное обогащение пищевых продуктов

Образцы выдержанной кинзы были обогащены лактозным бульоном, UP или TSB, приготовленными в соответствии с FDA BAM. Арахисовое масло и дополнительные образцы кинзы обогащали модифицированным буферным раствором пептонной воды [mBPW; Забуференная пептонная вода (BPW, Difco ^TM , Sparks, Мэриленд, США) с 3,5 г динатрийфосфата и 1,5 г монофосфата калия на литр].Выдержанные жидкие цельные яйца были обогащены TSB сульфатом железа, приготовленным в соответствии с FDA BAM. Выдержанные куриные бедра были обогащены BPW, неселективным бульоном для предварительного обогащения, рекомендованным в методе MLG для выделения и идентификации Salmonella из домашней птицы.

Бульоны для селективного обогащения

Две модификации, которые снижают селективную силу бульона ТТ, сравнивали со стандартным составом бульона ТТ, используемым в FDA BAM. Стандартный бульон БАМ ТТ состоит из базового бульона, в который в день использования добавляются растворы йода-калия иодида (I ₂ -KI) и красителя бриллиантового зеленого.Обе модификации TT, использованные в данном исследовании, состоят из основы бульона TT без добавления красителя бриллиантового зеленого. Модификация ТТ А (ТТ _А ) состоит из основы бульона ТТ с 2,0% раствора I ₂ –KI согласно БАМ, а модификация ТТ В (TT _B ) содержит только 1,0% раствора I ₂ –Ки раствор. Все методы FDA BAM, USDA MLG и ISO используют второй бульон селективного обогащения, называемый RV, для обнаружения Salmonella . RV, использованный в этом исследовании, был подготовлен в соответствии с методом FDA BAM.

Панель из 101 изолятов Salmonella , полученных из Управления оборонных исследований (DSO) Управления перспективных исследовательских проектов Министерства обороны США (DARPA), программы систем и анализов для проверки пищевых продуктов (SAFE), культивировали в селективных RV, TT, TT. _A и TT _B для сравнения эффективности при выздоровлении Salmonella . Коллекция SAFE используется FDA для проверки новых методов обнаружения Salmonella в пищевых продуктах. Коллекция разделена на три группы, представляющие набор подвидов Salmonella (55 штаммов), набор кластеров вспышек (26 штаммов) и пищевой набор (20 штаммов, дополнительная таблица S1).Параллельные наборы селективных бульонов RV, TT, TT _A и TT _B инокулировали 10 ³ или 10 ⁵ КОЕ каждого изолята Salmonella и инкубировали при 42 ± 2 ° C (RV) или 43 ± 0,2 ° C (TT, TT _A и TT _B ) в течение 24 ± 2 часов. На следующий день по 10 мкл каждой культуры высевали на агар с ксилозо-лизин-дезоксихолатом (XLD, Becton, Dickinson and Company, Sparks, MD, USA), и после 24 ч инкубации при 35 ± 2 ° C планшеты подвергали регистрируется как положительный (черные колонии) или отрицательный (отсутствие роста) для Salmonella .

24-часовое неселективное предварительное обогащение модификациями TT

Все образцы пищевых продуктов были обработаны в соответствии с рабочим процессом FDA BAM для обнаружения Salmonella с 24-часовым неселективным предварительным обогащением и стандартным и модифицированным бульонами TT, как указано ниже. В первый день после старения образцы пищевых продуктов асептически объединяли с 250 мл стерильного неселективного бульона для предварительного обогащения, массировали в течение 2 минут и инкубировали в течение ночи при 35 ± 2 ° C (рис. 1). На второй день аликвоты 24-часового неселективного предварительного обогащения в асептических условиях переносили в RV (100 мкл), TT (1.0 мл), TT _A (1,0 мл) и TT _B (1,0 мл) селективных бульонов для обогащения и инкубировали в течение ночи при 42 ± 0,2 ° C (RV) или 43 ± 0,2 ° C (TT) (Рисунок 1 ). На третий день по 10 мкл каждого селективного обогащения высевали на агаре с ксилозолизином Tergitol ^TM 4 (XLT4, Becton, Dickinson and Company, Sparks, MD, USA) и инкубировали в течение ночи при 35 ± 2 ° C. Оставшиеся объемы селективных обогащений RV, TT, TT _A и TT _B из образцов кинзы центрифугировали при 7100 rcf в течение 30 минут для осаждения бактерий для экстракции ДНК, представляющих 24RV, 24TT, 24TT _A , и 24TT _B временных точек, используемых для секвенирования гена 16S рРНК (рис. 1).Бактериальные осадки хранили при –20 ° C. На четвертый день подозрительные черные колонии из чашек XLT4 были подтверждены как Salmonella в системе VITEK 2 (BioMérieux, Франция).

РИСУНОК 1. Рабочий процесс обработки пищевых продуктов и сбора образцов. Во всех экспериментах использовалось положительных и отрицательных на Salmonella образцов пищевых продуктов, которые были выдержаны и обработаны для обнаружения Salmonella с использованием двух рабочих процессов. Образцы неселективного обогащения собирали через 5, 6 часов (рабочий процесс 1, зеленый) и 24 часа (рабочий процесс 2, желтый) для подсчета Salmonella , инокуляции селективных обогащений TT и RV и секвенирования гена 16S рРНК.Ежедневные этапы обработки образцов выполнялись в виде схемы в день 1 (синий), день 2 (розовый), день 3 (серый) и день 4 (оранжевый).

Сокращенное время инкубации для неселективного предварительного обогащения

В дополнение к образцам, обработанным в соответствии с графиком FDA BAM, повторяющиеся образцы каждого продукта инкубировали в течение сокращенного времени в соответствующих бульонах для предварительного обогащения (рис. 1). В частности, в первый день неселективное предварительное обогащение инкубировали при 35 ± 2 ° C в течение 5 или 6 часов, и аликвоты из каждого периода времени переносили в RV (100 мкл), TT (1.0 мл), TT _A (1,0 мл) и TT _B (1,0 мл) селективных бульонов и инкубировали в течение ночи при 42 ± 0,2 ° C (RV) или 43 ± 0,2 ° C (TT). На второй день каждый селективный бульон наносили штрихами на агар XLT4 и инкубировали в течение ночи. Оставшиеся объемы селективных бульонов RV, TT, TT _A и TT _B из каждой временной точки центрифугировали при 7100 rcf в течение 30 минут для осаждения бактерий для экстракции ДНК, представляющих 5 и 6-часовые RV, TT, TT. _A , TT _B образцы (далее именуемые sRV, sTT, sTT _A и sTT _B ) для секвенирования гена 16S рРНК (рисунок 1).Все бактериальные осадки хранили при –20 ° C. На третий день, за день до метода FDA BAM, подозрительные черные колонии из чашек с агаром XLT4 были подтверждены как Salmonella в системе VITEK 2.

Подсчет сальмонелл в кинзе

Неселективное предварительное обогащение

кинзы, инкубированных в течение 5, 6 и 24 часов, было подсчитано для Salmonella с использованием метода наиболее вероятного числа (MPN), описанного в FDA BAM. Неселективные пробы предварительного обогащения серийно разбавляли (в 10 раз) до 0.85% NaCl. Селективный TT _B инокулировали в трех экземплярах по 1,0 мл каждого разведения, инкубировали при 43 ± 0,2 ° C в течение 48 часов, а затем наносили штрихами на XLT4. Чашки с агаром XLT4 исследовали на наличие типичных черных колоний Salmonella , которые были подтверждены в системе VITEK 2. Для вычисления результатов использовался калькулятор FDA BAM MPN (www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm109656.htm).

Получение геномной ДНК

Бактериальные гранулы из селективных обогащенных образцов RV, TT, TT _A и TT _B лизировали в течение 20 минут при комнатной температуре с 100 нг / мкл лизоцима (Sigma – Aldrich; Сент-Луис, Миссури, США). с последующей экстракцией ДНК на QIACube с использованием мини-протокола QIAamp DNA (QIAGEN, Германия).

Селективное обогащение гена 16S рРНК

Стратегию двухэтапной ПЦР-амплификации использовали для создания ампликонов гена 16S рРНК со штрих-кодом с четырьмя наборами праймеров ПЦР, нацеленных на области от переменной 1 до переменной 3 (от V1 до V3) гена. В эти праймеры добавлены пары оснований перед геном 16S рРНК с целью добавления разнообразия нуклеотидных оснований к начальным циклам секвенирования на Illumina MiSeq (дополнительная таблица S2). Было приготовлено четыре мастер-микса, по одному на каждый набор праймеров, состоящий из 3 штук.0 нг матричной ДНК, 5,0 мкл 5 × Omni Klentaq Master Mix (DNA Polymerase Technology, Inc., Сент-Луис, Миссури, США), 10,0 мкл коктейля PCR Enhancer Cocktail (DNA Polymerase Technology, Inc., Сент-Луис, Миссури, США) ) и по 1,5 мкл каждого прямого и обратного праймеров (конечная концентрация 600 нМ). Условия цикла ПЦР состояли из 2-минутной денатурации при 94 ° C, затем 25 циклов по 40 с при 94 ° C, 15 с при 56 ° C, 40 с при 68 ° C и окончательное удлинение при 68 ° C для 5 мин. ПЦР-ампликоны гена 16S рРНК визуализировали на 1% агарозном геле и очищали с использованием набора для очистки ПЦР QIAquick (QIAGEN, Germantown, MD, USA), если присутствовало несколько полос.

Во втором наборе реакций ПЦР в качестве матрицы использовались продукты ПЦР ампликона гена 16S рРНК с индексирующими праймерами Illumina Nextera XT для создания уникальных ампликонов ПЦР, совместимых с химией секвенирования Illumina MiSeq. Вкратце, ампликоны гена 16S рРНК были количественно определены с использованием флуориметра Qubit 2.0 (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США), затем амплифицированы в реакциях 50 мкл с ~ 150 нг продуктов ампликонов, 5 × Omni Klentaq Master Mix и 5 мкл каждого праймеры для индексации Illumina i7 и i5 из набора Nextera XT Indexing Kit (Illumina Inc., Сан-Диего, Калифорния, США). Индексирующие условия циклов ПЦР включали: начальные 3 мин и 30 с выдержки при 72 и 98 ° C соответственно, затем 5 циклов по 10 с при 98 ° C, 30 с при 63 ° C и 3 мин при 72 ° C, а также окончательная выдержка при 10 ° С.

Подготовка библиотеки и секвенирование гена 16S рРНК

Библиотеки

были отобраны по размеру с использованием шариков Agencourt AMPure XP (Beckman Coulter, Brea, CA, USA) до среднего размера библиотеки 600 пар оснований, а затем количественно определены с использованием флуорометра Qubit 2.0. Качество библиотеки проверялось на биоанализаторе Agilent Technologies 2100 (Agilent Technologies, Inc., Санта-Клара, Калифорния, США) с использованием набора микросхем DNA 1000. Выбранные по размеру библиотеки были нормализованы до 2 нМ с использованием набора для планшетов для нормализации SequelPrep, объединены и затем измерены с использованием высокочувствительных реагентов Qubit (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США). Пул библиотеки денатурировали 0,1 н. NaOH, серийно разбавляли до 8 мкМ с помощью HT1, добавляли 10% ДНК бактериофага PhiX174, 12,5 мкМ, а затем секвенировали с использованием 600-циклового набора реагентов MiSeq Reagent Kit v3 (Illumina Inc., Сан-Диего, Калифорния, США. ) за четыре цикла секвенирования: два с 96 образцами, один с 86 образцами и один с 87 образцами.

Обработка и анализ данных последовательности гена 16S рРНК

сырых парных чтений, выводимых платформой MiSeq, были объединены в согласованные фрагменты с помощью FLASH (Magoc and Salzberg, 2011) и впоследствии отфильтрованы по качеству (максимальная частота ошибок 1%) и длине (минимум 200 бит / с) с использованием Trimmomatic и QIIME (Caporaso et al. al., 2010; Kuczynski et al., 2011; Bolger et al., 2014). Ложные попадания в контрольный геном PhiX были идентифицированы с помощью BLASTn и удалены. Проходящие последовательности отрезали от праймеров и оценивали на химеры с помощью UCLUST (режим de novo ) (Edgar et al., 2011). Загрязнения хлоропластов были обнаружены и отфильтрованы с использованием классификатора RDP с порогом достоверности 80% (Wang et al., 2007). Последовательности были дополнительно проверены на наличие неизвестных примесей с использованием чувствительного поиска BLASTn по базе данных GreenGenes (McDonald et al., 2012). Для нормализации между образцами профили последовательностей гена 16S рРНК были разделены на подвыборку до равного уровня охвата перед последующими сравнениями. Последовательности гена 16S рРНК высокого качества были отнесены к таксономической линии с помощью Resphera Insight (Балтимор, Мэриленд, США; www.respherabio.com). В имитационном анализе сообщества были сопоставлены назначения Resphera Insight с конвейерами UCLUST-Ref и RDP по умолчанию, реализованными в QIIME (Caporaso et al., 2010; Kuczynski et al., 2011).

Два прогона Illumina MiSeq, мультиплексированные с 96 образцами, дали в общей сложности 9631 743 и 6 949 843 качественно отфильтрованных генных последовательностей 16S рРНК со средней (среднее ± стандартное отклонение) длиной считывания 412 ± 19 и 378 ± 27 соответственно. Восемьдесят семь мультиплексированных образцов в третьем прогоне Illumina MiSeq сгенерировали 8 875 924 последовательности с качественной фильтрацией со средней длиной считывания 409 ± 24.Четвертый прогон MiSeq из 86 образцов дал 7 631 971 считывание с качественной фильтрацией со средней длиной считывания 399 ± 24. Необработанные последовательности ампликона 16S, описанные в этой статье, депонированы в репозиторий NCBI SRA (номер доступа в BioProject PRJNA343808).

Проверка Resphera Insight

Для проведения внешней проверки точности Resphera Insight на уровне видов мы использовали 110 полногеномных наборов данных с дробовиком из проекта GenomeTrakr (идентификатор проекта NCBI PRJNA183844), обозначенных как новый S.enterica . Необработанные последовательности с парными концами фильтровали по качеству и длине с последующим объединением перекрывающихся последовательностей с помощью FLASH (Magoc and Salzberg, 2011). Затем слитые считывания подвергались скринингу на фрагменты 16S рРНК с использованием Bowtie2 (Langmead and Salzberg, 2012) в сравнении с обширной базой данных последовательностей генов 16S рРНК с дополнительной фильтрацией на основе BLAST для подтверждения совпадения с конкретным местоположением запроса со ссылкой S . enterica Ген 16S рРНК ( Salmonella enterica ssp. enterica серовар Typhimurium штамм LT2; Присоединение NCBI NR_074910.1).

Проходящие последовательности были отправлены в Resphera Insight (Балтимор, Мэриленд, США; www.respherabio.com) для таксономической идентификации с высоким разрешением. Мы также сравнили производительность Insight с классификатором RDP и эталонными алгоритмами UCLUST, реализованными в QIIME (Kuczynski et al., 2012; Navas-Molina et al., 2013). Нашим основным показателем эффективности был показатель истинно положительных результатов диагностики (DTP), определяемый как процент считываний с однозначным соответствием S.enterica , и мы оценили различия в точности, связанные с изменениями длины считывания и положения гена.

ТАБЛИЦА 2. Процент извлечения Salmonella из бульонов селективного обогащения.

Статистический анализ

Тесты

Z были выполнены для сравнения скорости выделения изолятов Salmonella SAFE, инокулированных в TT, TT _A и TT _B . Тесты Z также использовались для сравнения эффективности неселективного обогащения лактозы, mBPW, TSB и UP через 5, 6 и 24 часа для выделения Salmonella из селективного RV, TT _A , TT _B и TT, а также для сравнения эффективности бульонов селективного обогащения.Для лестничных сравнений значения p были скорректированы для множественных сравнений с использованием метода Бенджамини и Хохберга (программное обеспечение R v3.2) после внесения поправок на непрерывность (SAS 9.4).

Результаты

Salmonella Извлечение из бульонов селективного обогащения TT, TT _A , TT _B и RV

Поскольку при пониженном неселективном предварительном обогащении, вероятно, будет меньше метаболически активных клеток Salmonella по сравнению с 24-часовым предварительным обогащением, мы сначала оценили чувствительность стандартных и модифицированных бульонов для селективного обогащения RV и TT на низком уровне. уровень посевного материала для имитации этих условий.Для этого мы непосредственно инокулировали бульоны RV и TT 10 ³ КОЕ / мл каждого из 101 изолята SAFE. Мы также непосредственно засевали бульоны TT и RV с высоким посевным материалом 10 ⁵ КОЕ / мл в качестве контрольных образцов. Среди селективных бульонов, инокулированных 10 ³ КОЕ / мл Salmonella , селективные бульоны TT _B и TT _A имели значительно более высокие коэффициенты извлечения 92 и 88% ( P ≤ 0,001) по сравнению с FDA. Состав БАМ ТТ (17%) (таблица 2; дополнительная таблица S1).Набор кластеров вспышек показал самое низкое извлечение из бульона BAM TT — 4% (таблица 2; дополнительная таблица S1). Кроме того, наборы для набора Outbreak и Food из штаммов Salmonella SAFE были извлечены на 100 и 90% в TT _B , соответственно, что значительно выше, чем в составах FDA BAM TT (таблица 2; дополнительная таблица S1). Интересно, что извлечение Salmonella из BAM RV (58%) также было ниже, чем TT _A (88%) и TT _B (92%) для всей коллекции SAFE (таблица 2; дополнительная таблица S1).

Мы инокулировали второй набор бульонов BAM RV и TT с коллекцией SAFE Salmonella при 10 ⁵ КОЕ / мл и смогли восстановить 97 и 75% изолятов, соответственно, что указывает на то, что для некоторых из панели SAFE штаммов, селективные бульоны БАМ требуют более 10 ⁵ КОЕ / мл в неселективном предварительном обогащении пищевых продуктов для выделения Salmonella (таблица 2; дополнительная таблица S1). Набор подвидов изолятов Salmonella имел самые низкие уровни извлечения из 10 ⁵ КОЕ / мл BAM RV (95%) и TT (75%, таблица 2).Наборы Outbreak и Food штаммов SAFE были выделены в 100% BAM RV и в 73 и 80% в бульонах BAM TT, соответственно, на этом уровне инокулята (таблица 2).

Таким образом, мы определили, что бульоны TT _A и TT _B значительно улучшили выделение Salmonella (инокулированный при 10 ³ КОЕ / мл) и дали положительные результаты в 88 и 92%, соответственно, Тестируемые изоляты SAFE сравнивали со степенью восстановления BAM TT и RV 17 и 58% соответственно (Таблица 2).

Сравнение лактозного бульона с mBPW с TT, TT _A , TT _B и селективными бульонами RV

Перед тестированием нашего протокола сокращенного неселективного предварительного обогащения мы сначала протестировали два неселективных бульона для предварительного обогащения (лактозу и mBPW), с тремя составами селективных бульонов TT (TT, TT _A , TT _B ) и RV для выделения Salmonella из кинзы, чтобы определить эффективность этих различных составов сред на образцах пищевых продуктов.Для этих экспериментов образцы кинзы инокулировали Salmonella в концентрации ~ 28 КОЕ / 25 г и выдерживали при 4 ° C перед 24-часовым неселективным предварительным обогащением. 24-часовое неселективное предварительное обогащение инокулировали в четыре селективных бульона RV и TT, а затем высевали на XLT4 для выделения и подтверждения Salmonella (рис. 1). 24-часовое предварительное обогащение бульона лактозы ( n = 13) имело степень извлечения 77% (10/13), 69% (9/13), 92% (12/13) и 92% (12/13). 13) от селективного обогащения RV, TT, TT _A и TT _B соответственно (таблица 3).Для сравнения, бульоны селективного обогащения, инокулированные неселективным предварительным обогащением mBPW в течение 24 часов ( n = 33), привели к 100% степени извлечения во всех четырех бульонах селективного обогащения, что позволяет предположить, что mBPW улучшило реанимацию Salmonella в кинза (таблица 3). Подсчет трех лактозных и двух mBPW 24-часового неселективного предварительного обогащения с использованием метода MPN выявил уровни Salmonella , равные 0,00 в бульоне лактозы и 7,44 ± 1,15 log MPN g ^-1 в mBPW, что подтверждает более низкие уровни извлечения из Лактозный бульон в 24-часовом неселективном предварительном обогащении (Таблица 4).

ТАБЛИЦА 3. Процент извлечения Salmonella из неселективного предварительного обогащения кинзы.

ТАБЛИЦА 4. Среднее значение log MPN г ^-1 Salmonella , выделенная из неселективного предварительного обогащения кинзы.

Восстановление Salmonella 1 день Ранее в TT _B

Для оптимизации сокращенного времени обогащения для Salmonella четыре селективных бульона (RV, TT, TT _A и TT _B ) были протестированы параллельно с mBPW и неселективным предварительным обогащением лактозы, инкубированных в течение 5 и 6 часов вместо 24 часов, рекомендованных в BAM (Рисунок 1). Salmonella была выделена днем ​​ранее на XLT4 из 97% (32/33) образцов кинзы, когда бульоны TT _B были инокулированы 6-часовыми предварительными обогащениями mBPW, которые, как было обнаружено, содержали 2,00 ± 0,42 MPN g ^{— 1} Salmonella (таблицы 3 и 4). Напротив, извлечение Salmonella составило только 69% (9/15), когда TT _B был засеян 6-часовым предварительным обогащением лактозой, что, соответственно, имело более низкий уровень загрязнения Salmonella , 0.37 ± 0,32 МПН г ^-1 (Таблицы 3 и 4). В других селективных бульонах, инокулированных 6-часовым предварительным обогащением mBPW и лактозой, выход, соответственно, снизился до 85% (28/33) и 46% (6/13) в TT _A , 3% (1/33 ) и 15% (2/15) в TT, и 9% (3/33) и 38% (5/13) в RV (Таблица 3). Выделение типичных колоний Salmonella на XLT4 было возможным, но не согласованным с использованием 5-часовых реанимированных проб mBPW и лактозного бульона, в диапазоне от 0 до 52% в зависимости от используемого селективного бульона (Таблица 3).Примечательно, что чашки XLT4, полученные из бульона TT _B , инокулированного 5- и 6-часовым неселективным предварительным обогащением, практически не имели фоновой флоры, тогда как чашки из 24-часового неселективного предварительного обогащения были последовательно смешанными культурами. .

Два дополнительных неселективных бульона для предварительного обогащения, TSB и UP, были протестированы на их способность извлекать Salmonella днем ​​ранее в результате селективного обогащения. Для этих исследований RV и TT _B были инокулированы с t

Требование выборочной службы и иммиграционный закон

Знакомство с выборочной службой и иммиграцией

Мужской U.Граждане S. (USC) и законные постоянные жители (LPR) обязаны регистрироваться для выборочной службы в возрасте от 18 до 25 лет. В контексте иммиграции, если иностранец, который должен был это сделать, не может зарегистрироваться для выборочной службы, там могут иметь неблагоприятные последствия для иммиграции, включая непостоянный запрет на натурализацию. В этой статье будет объяснено требование выборочной службы в контексте иммиграции и последствия отказа от регистрации в выборочной службе, если это необходимо.

Обязательства по отбору услуг для иммигрантов и неиммигрантов

Мужчины-иммигранты с документами и без документов в возрасте от 18 до 25 лет должны зарегистрироваться для выборочной службы. Закон требует, чтобы регистрация происходила в течение 30 дней после 18-летия мужчины, но поздняя регистрация принимается до того, как ему исполнится 26 лет. Иностранцы без документов могут зарегистрироваться для выборочной службы даже без номера социального страхования (SSN), хотя Система выборочного обслуживания (SSS) рекомендует, чтобы, если впоследствии SSN будет получен, иностранец должен сообщить SSS.Существуют исключения для лиц, находящихся на действительной службе в вооруженных силах США, курсантов или гардемаринов Академий службы или Академии береговой охраны, а также студентов определенных программ закупки офицеров (см. Таблицу для конкретных программ). Полный список см. В следующей таблице SSS:

Важно отметить, что SSS прямо заявляет, что не собирает информацию об иммиграционном статусе иностранца или его отсутствии. Не имеющие документов иностранцы мужского пола в возрасте от 18 до 25 лет должны выполнять требования выборочного обслуживания и знать, что они не подвергают себя большему риску неблагоприятных иммиграционных последствий, поступая таким образом.

Иностранцы, находящиеся в Соединенных Штатах по действующей неиммиграционной визе, не обязаны регистрироваться для выборочного обслуживания, пока они остаются в статусе. Однако, если иностранец в возрасте от 18 до 25 лет позволяет утратить свой статус, он должен будет зарегистрироваться для выборочной службы, если он останется в Соединенных Штатах. Лица, получившие убежище, беженцы и условно-досрочно освобожденные, должны зарегистрироваться для выборочной службы.

Иностранцам, которые должны зарегистрироваться и которые намереваются получить финансовую помощь для студентов, работу в государственном учреждении или пособия по профессиональному обучению, рекомендуется незамедлительно зарегистрироваться непосредственно в выборочной службе, чтобы гарантировать право на получение таких льгот.

Записка о мужчинах и женщинах-транссексуалах

Требование выборочной службы распространяется на любого человека, рожденного мужчиной, независимо от смены пола. Кроме того, это не распространяется на всех, кто родился женщиной, независимо от смены пола.

USCIS помогает заявителям на регистрацию на законное постоянное место жительства

Начиная с 1 декабря 2000 года Служба гражданства и иммиграции США полностью перешла на использование формы I-485 «Заявление на регистрацию постоянного места жительства или изменение статуса» для подачи заявлений на получение статуса LPR.Среди прочего, это упростило процесс выборочной подачи заявок на обслуживание для заявителей LPR.

Когда USCIS принимает форму I-485, поданную мужчиной в возрасте от 18 до 25 лет, она передает его информацию в SSS [см. Стр. 6], и он автоматически регистрируется. Однако, если заявление не принимается и иностранцу необходимо зарегистрироваться, он должен сделать это непосредственно в SSS. SSS всегда проверяет свои записи при получении заявки, чтобы избежать дублирования.

Выборочная служба и право на натурализацию

Отказ зарегистрироваться для выборочной службы составляет непостоянный запрет на натурализацию. Согласно Руководству по политике USCIS, заявителя, который, по всей видимости, не смог зарегистрироваться, могут попросить предоставить информационное письмо о статусе и карточку подтверждения регистрации. ¹ Заявитель будет иметь возможность продемонстрировать преобладанием доказательств, что отказ от регистрации не был умышленным действием (отказ USCIS или SSS зарегистрировать заявителя не будет считаться преднамеренным отказом). ²

Претенденты на натурализацию, не прошедшие регистрацию, в возрасте от 18 до 25 лет, как правило, не имеют права на натурализацию. Поскольку период хороших моральных качеств (GMC) для натурализации составляет 5 лет, заявитель в возрасте от 26 до 31, не прошедший регистрацию, может быть признан не имеющим права на натурализацию, если он не сможет доказать, что отказ в регистрации был сознательным или преднамеренным. Кандидаты в возрасте старше 31 года, не прошедшие регистрацию, как правило, не будут признаны непригодными для натурализации из-за невозможности регистрации. ³

Обратите внимание, что мужчины, родившиеся после 29 марта 1957 г., но до 31 декабря 1959 г., освобождаются от требования о выборочной регистрации в службе. ⁴

Территория депортации

Судимость за нарушение или сговор с целью нарушения законов об избирательной службе является основанием для депортации в соответствии с разделом 237 (a) (2) (D) Закона об иммиграции и гражданстве (INA).

Служба выборочной службы и иммиграция

Выполнить требование о выборочной регистрации услуг несложно, и каждый человек, присутствующий в Соединенных Штатах, который должен зарегистрироваться, должен сделать это без промедления.Учитывая иммиграционные проблемы, которые могут возникнуть из-за невыполнения требования — особенно для тех, кто намеревается добиваться натурализации — нет абсолютно никаких причин не регистрироваться для выборочной службы.

Заявитель, столкнувшийся с непостоянным запретом на натурализацию из-за требований о предоставлении избирательных услуг, должен проконсультироваться с опытным иммиграционным адвокатом для получения рекомендаций.

___________________

1. Руководство USCIS по политике, Том 12, Глава 7 — Приложение к Конституции
2. ид., 50 U.S.C. Приложение. 462
3. См. Также памятку , Йейтс, заместитель исполнительного директора. Доц. Comm., Field Operations (18 июня 1999 г.), опубликовано в AILA InfoNet в Док. № 9
   40
4. См. Proc. № 4771 от 2 июля 1980 г. 1-101, 94 Stat. 3775 (1980). См. 50 U.S.C. Приложение. 456 (а). См. Разд. 3 (а) Закона о военной выборной службе [50 U.S.C. Приложение. 453 (а)].

Ресурсы и материалы:

«Иммигранты и лица с двойным гражданством», SSS, получено 20 октября 2015 г., доступно по адресу https: // www.sss.gov/Registration/Immigrants-and-Dual-Nationals (версия PDF)

«Кто должен регистрироваться», SSS, , получено 20 октября 2015 г., доступно по адресу https://www.sss.gov/Registration-Info/Who-Registration (версия PDF)

.